Q Seplife XL層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的瓊脂糖層析介質(zhì),是在高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上嫁接葡聚糖“觸手”,然后偶聯(lián)三甲胺基烷基季銨鹽基團(tuán)形成的一種強(qiáng)陰離子交換介質(zhì)。Q Seplife XL層析介質(zhì)具有超高載量、高流速、低反壓、良好的化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械性能,非特異性吸附低,回收率高,方便進(jìn)行規(guī)模放大,可縮短生產(chǎn)時(shí)間,提高生產(chǎn)效率。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換分離。
產(chǎn)品牌號(hào) | Q Seplife XL |
外觀 | 白色球狀凝膠,無臭無味 |
種類 | 強(qiáng)陰離子交換填料 |
基質(zhì) | Seplife XL微球 |
配基 | 三甲胺基烷基季銨鹽基團(tuán) |
粒徑(μm) | 45~165 |
pH穩(wěn)定性 | 2~12(長期),1~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在以下液體中穩(wěn)定:所有常用的水相緩沖液;非離子去污劑;6mol/L 鹽酸胍;1mol/L NaOH;20%乙醇 |
吸附量(mg /ml) | >160mg/ml(BSA) |
離子交換量(mmol /ml) | 0.18~0.25 |
工作溫度 | 4~30℃ |
最高流速*cm/h | 750 |
耐壓MPa | 0.3 |
應(yīng)用 | 用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換分離 |
*檢測條件:層析柱16mm×300mm;*柱床高15cm;溫度25℃;流動(dòng)相為0.1mol/L NaCl。
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。平衡液是低濃度的緩沖溶液,如Tris、PBS等。
3.3上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
(3)介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小,介質(zhì)對樣品組分吸附較牢。用Q層析介質(zhì)時(shí),推薦的pH值是大于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn)1個(gè)單位。
3.4洗脫
可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫,常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
3.5再生
一般先用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積,然后用結(jié)合蛋白時(shí)的平衡液洗到平衡即可。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
3.6在位清洗
(1)對于沉淀或失活蛋白質(zhì),可先用2倍柱床體積6M 鹽酸胍沖洗,然后用至少5倍柱床體積的無菌平衡緩沖溶液,pH7~8,反相沖洗。
(2)對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,先用2倍柱床體積的非離子去污劑(濃度0.1%)沖洗,然后用至少5倍柱床體積的無菌平衡緩沖溶液,pH7~8,反相沖洗。或者先用3~4倍柱床體積的70%乙醇溶液沖洗,然后用至少5倍柱床體積的無菌平衡緩沖溶液,pH7~8,反相沖洗。需注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
3.7存儲(chǔ)
密封保存在4~30℃(保存溶液為20%乙醇)干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
注意事項(xiàng)
(1)柱的選擇:從理論上說,只要柱足夠長,就可以獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低;柱的直徑增加,使液體流動(dòng)的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
(2)純化過程必須嚴(yán)格控制洗脫緩沖液的pH及離子強(qiáng)度。樣品與Q層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(4)洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過快。
(5)上樣的體積要小,濃度不宜過高。
(6)加樣及整個(gè)洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Q Seplife XL | A2034202 | 25ml |
A2034203 | 100ml | |
A2034204 | 500ml | |
A2034205 | 1L | |
A2034206 | 5L | |
A2034207 | 10L |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
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