Plasmid Seplife LX親和層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的親硫芳香族瓊脂糖層析介質(zhì),用于純化超螺旋DNA,廣泛應(yīng)用于基因治療和DNA疫苗的開發(fā)應(yīng)用。該層析介質(zhì)具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械性特點,方便進(jìn)行規(guī)模放大,可縮短生產(chǎn)時間,提高生產(chǎn)效率。
產(chǎn)品牌號 | Plasmid Seplife LX |
外觀 | 白色球狀,無臭無味 |
基質(zhì) | 高交聯(lián)瓊脂糖微球 |
配基 | 巰基吡啶 |
配基密度 | 27–50 μmol/mL |
粒徑 d50v | 36–44 μm |
動態(tài)載量(mg /ml) | ≥3mg /ml |
工作溫度 | 4~30℃ |
流速* | 柱床高20cm,壓力0.3MPa,流速220cm/h |
pH穩(wěn)定性 | 3~13(長期),2~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在以下液體中穩(wěn)定:所有常用的水相緩沖液;1mol/L 氫氧化鈉;70% 乙醇;40%異丙醇;1M 醋酸 |
儲存 | 20%乙醇,4~30℃ |
應(yīng)用 | 廣泛應(yīng)用于基因治療和DNA疫苗的開發(fā)應(yīng)用 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。平衡液是含高濃度硫酸銨的Tris緩沖溶液,推薦緩沖液:2 M(NH4)2SO4,10mM EDTA,100mM Tris-HCl,pH 7.5 。
3.3上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
3.4洗脫
常用低濃度的硫酸銨溶液(1.7M)加0.3M氯化鈉溶液洗脫。
推薦洗脫液:100mM Tris-HCl,1.7 M (NH4)2SO4,10 mM EDTA, pH 7.5 + 0.3 M NaCl。
3.5再生
一般可用100 mM Tris, 10 mM EDTA洗脫5倍以上柱體積,然后用結(jié)合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。
3.6在位清洗
(1)對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床體積的2M NaCl去除。
(2)對于沉淀蛋白、疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,一般先用1mol/L NaOH洗脫5倍以上柱體積,然后用結(jié)合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。
(3)對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,需注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
3.7存儲
密封保存在4~30℃(保存溶液為20%乙醇)干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運。
注意事項
(1)柱的選擇:從理論上說,只要柱足夠長,就可以獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低;柱的直徑增加,使液體流動的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
(2)純化過程樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(4)洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過快。
(5)加樣及整個洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
Plasmid Seplife LX | A4690102 | 25ml |
A4690103 | 100ml | |
A4690104 | 500ml | |
A4690105 | 1L | |
A4690106 | 5L | |
A4690107 | 10L |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
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注冊人地址/銷售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號5樓525室
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