Blue Seplife FF層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì)，它是將藍(lán)色染料汽巴蘭（Cibacron Blue 3G-A）偶聯(lián)到高流速瓊脂糖凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)上。Blue Seplife FF與目標(biāo)蛋白的結(jié)合主要是配基提供的電子對(duì)與疏水作用的綜合結(jié)果。該介質(zhì)具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，基團(tuán)脫落少，使用壽命長(zhǎng)，使用方便，應(yīng)用非常廣泛，可用于白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+酶的分離純化。

使用方法

3.1裝柱

裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

用2～5個(gè)柱床體積的初始緩沖溶液進(jìn)行平衡，直至pH和電導(dǎo)率保持不變。平衡緩沖液一般是根據(jù)需要純化的蛋白來(lái)決定用哪種緩沖液。 

3.3上樣

（1）不同物質(zhì)和介質(zhì)會(huì)有強(qiáng)弱不同的結(jié)合能力，主要取決于流速、pH、緩沖溶液組成和溫度。

（2）樣品pH 應(yīng)該和平衡緩沖液pH相同，上樣前樣品應(yīng)該用0.22um或者0.45um的濾膜過(guò)濾，可以延長(zhǎng)凝膠的使用壽命。

（3）上樣完后用緩沖液平衡，直至流出液電導(dǎo)和pH不變。

3.4洗脫

（1）洗脫液根據(jù)需要純化的樣品決定。可以采用改變緩沖液pH、極性或者離子強(qiáng)度。

（2）特異性吸附蛋白可以采用低濃度競(jìng)爭(zhēng)洗脫、梯度或者線性洗脫。

3.5 再生

 對(duì)于使用過(guò)的凝膠，先用2~3倍柱床體積的0.1mol/L Tris·HCl+0.5mol/L NaCl（pH8.5）和0.1mol/L NaAc+0.5mol/L NaCl（pH4.5）依次反復(fù)沖洗3~4次，然后用平衡緩沖溶液平衡。在一些應(yīng)用中，變性蛋白或者一些脂類物質(zhì)在再生步驟不會(huì)被洗脫掉，可以采用在位清洗（CIP）去除。

3.6在位清洗

層析純化過(guò)程中產(chǎn)生的沉淀或變性蛋白可用如下方法進(jìn)行在位清洗：

（1）先用4倍柱床體積0.1M NaOH，流速40cm/h清洗；

（2）然后用3~4倍柱床體積2M硫氰酸鉀溶液清洗柱子；

（3）最后立即用至少5倍柱床體積的緩沖液平衡柱子（pH8.0）。

3.7存儲(chǔ)

保存在2~8℃，20%乙醇溶液中（pH8.0，含0.1M磷酸二氫鉀），干燥、通風(fēng)、清潔處。避免與氧化劑接觸，不可冷凍。

3.8運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

注意事項(xiàng)

（1）樣品必須澄清沒(méi)有顆粒。

（2）樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進(jìn)行柱層析。 

（3）所裝的柱床必須表面平整，無(wú)溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。

（4）洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速，且勿過(guò)快。

（5）加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中，嚴(yán)防柱面變干。

（6）本品應(yīng)避免與氧化劑接觸，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。

生產(chǎn)日期：見(jiàn)標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

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