DEAE Seplife  A50層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的葡聚糖層析介質(zhì)，具有高流速、低反壓、高動(dòng)態(tài)載量及良好的化學(xué)穩(wěn)定性。DEAE seplife? A-50層析介質(zhì)方便進(jìn)行規(guī)模放大，可以縮短生產(chǎn)時(shí)間，提高生產(chǎn)效率，降低大規(guī)模生產(chǎn)成本。

使用方法

DEAE Seplife  A50是粉末狀，使用時(shí)需要溶脹，其溶脹比取決于所使用的緩沖溶液，不同溶液中的溶脹比不同，而且存在較大差異。溶脹時(shí)不能使用磁力攪拌，否則易導(dǎo)致凝膠破碎。

3.1預(yù)處理

稱取所需量的DEAE Seplife  A50(以下簡(jiǎn)稱A-50)，置于50~100倍蒸餾水或者上樣平衡液中，溶脹，室溫條件下一般需要溶脹1~2天，沸水中一般需要2小時(shí)。

3.2 裝柱

裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

備注：如果以最大線性流速裝柱子，在隨后的色譜分離過(guò)程中流速不要超過(guò)裝柱流速

的75%。

3.3平衡

使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子，務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。

3.4上樣

根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)物濃度和凝膠的載量確定上樣量。

3.5清洗

上樣完畢后，再使用上樣緩沖液平衡柱子，清洗掉不結(jié)合的蛋白和雜質(zhì)，直至流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。

3.6洗脫

對(duì)于DEAE Seplife  A50使用增大緩沖液中鹽離子濃度的方法連續(xù)洗脫或者梯度洗脫。

3.7 再生

在柱上先以1~2M NaCl洗去柱上的雜蛋白，再以蒸餾水洗去柱中鹽。然后按預(yù)處理過(guò)程將A-50再處理一遍即可。

3.8存儲(chǔ)

DEAE Seplife  A50干粉保存于4~30℃、干燥、通風(fēng)、清潔處；溶脹后的凝膠保存于4~8℃，20%乙醇或者0.1M NaOH溶液中。

3.9運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

4.注意事項(xiàng)

（1）柱的選擇：從理論上說(shuō)，只要柱足夠長(zhǎng)，就可以獲得理想的分辨率，但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān)，柱長(zhǎng)增加使流速減慢，峰變寬，分辨率降低；柱的直徑增加，使液體流動(dòng)的不均勻性增加，分辨率明顯下降。 

（2）純化過(guò)程必須嚴(yán)格控制洗脫緩沖液的pH及離子強(qiáng)度。樣品與DEAE seplife? A-50必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進(jìn)行柱層析。 

（3）所裝的柱床必須表面平整，無(wú)溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。

（4）洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速，且勿過(guò)快。

（5）上樣的體積要小，濃度不宜過(guò)高。

（6）加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中，嚴(yán)防柱面變干。

生產(chǎn)日期：見(jiàn)標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

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