Blue Seplife FF層析介質是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質，它是將藍色染料汽巴蘭（Cibacron Blue 3G-A）偶聯到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質上。Blue Seplife FF與目標蛋白的結合主要是配基提供的電子對與疏水作用的綜合結果。該介質具有良好的化學穩(wěn)定性，基團脫落少，使用壽命長，使用方便，應用非常廣泛，可用于白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+酶的分離純化。

使用方法

3.1裝柱

裝柱按照標準操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

用2～5個柱床體積的初始緩沖溶液進行平衡，直至pH和電導率保持不變。平衡緩沖液一般是根據需要純化的蛋白來決定用哪種緩沖液。 

3.3上樣

（1）不同物質和介質會有強弱不同的結合能力，主要取決于流速、pH、緩沖溶液組成和溫度。

（2）樣品pH 應該和平衡緩沖液pH相同，上樣前樣品應該用0.22um或者0.45um的濾膜過濾，可以延長凝膠的使用壽命。

（3）上樣完后用緩沖液平衡，直至流出液電導和pH不變。

3.4洗脫

（1）洗脫液根據需要純化的樣品決定。可以采用改變緩沖液pH、極性或者離子強度。

（2）特異性吸附蛋白可以采用低濃度競爭洗脫、梯度或者線性洗脫。

3.5 再生

 對于使用過的凝膠，先用2~3倍柱床體積的0.1mol/L Tris·HCl+0.5mol/L NaCl（pH8.5）和0.1mol/L NaAc+0.5mol/L NaCl（pH4.5）依次反復沖洗3~4次，然后用平衡緩沖溶液平衡。在一些應用中，變性蛋白或者一些脂類物質在再生步驟不會被洗脫掉，可以采用在位清洗（CIP）去除。

3.6在位清洗

層析純化過程中產生的沉淀或變性蛋白可用如下方法進行在位清洗：

（1）先用4倍柱床體積0.1M NaOH，流速40cm/h清洗；

（2）然后用3~4倍柱床體積2M硫氰酸鉀溶液清洗柱子；

（3）最后立即用至少5倍柱床體積的緩沖液平衡柱子（pH8.0）。

3.7存儲

保存在2~8℃，20%乙醇溶液中（pH8.0，含0.1M磷酸二氫鉀），干燥、通風、清潔處。避免與氧化劑接觸，不可冷凍。

3.8運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。

注意事項

（1）樣品必須澄清沒有顆粒。

（2）樣品與層析介質必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進行柱層析。 

（3）所裝的柱床必須表面平整，無溝流及氣泡，否則應重裝。

（4）洗脫過程中應嚴格控制流速，且勿過快。

（5）加樣及整個洗脫過程中，嚴防柱面變干。

（6）本品應避免與氧化劑接觸，避免長時間暴露在空氣中。

生產日期：見標簽

使用期限：在適當的貯藏條件下可貯藏5年

注冊人名稱/生產企業(yè)：西安藍曉科技新材料股份有限公司

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