Seplife CL-6B瓊脂糖層析介質(zhì)是用6%交聯(lián)瓊脂糖制備成的凝膠顆粒,本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖層析介質(zhì),具有非特異性吸附低,回收率高,可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),可用于分子量差異大、對(duì)分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。
產(chǎn)品牌號(hào) | Seplife CL-6B |
外觀 | 白色球狀凝膠,無(wú)臭無(wú)味 |
基質(zhì) | 6%交聯(lián)瓊脂糖凝膠 |
pH穩(wěn)定性 | 3~13(長(zhǎng)期),2~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 可耐8mol/L 尿素、6mol/L 鹽酸胍;有機(jī)溶劑,如:乙醇、DMF、THF、DMS、氯仿、丙酮、吡啶、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、乙腈 |
排阻極限 | 10000~4×106(球蛋白) |
粒徑(um) | 45~165 |
耐壓流速*(cm/h) | 110~210cm/h (在0.15Mpa) |
耐熱性 | 120℃,pH7水中20min |
應(yīng)用 | 用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的凝膠過(guò)濾層析純化 |
*檢測(cè)條件:層析柱16mm×300mm;*柱床高10cm;溫度25℃;流動(dòng)相為0.1mol/L NaCl。
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。
3.3上樣
(1)樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。
(2)介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。
(3)上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離效果越好。
3.4洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
3.5再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
3.6清洗
(1)對(duì)于沉淀蛋白、非特異性吸附蛋白和脂蛋白,可用0.5M NaOH清洗去除;
(2)對(duì)于非特異性吸附較強(qiáng)的蛋白、脂蛋白和脂類,可先用2倍柱床體積的非離子去污劑(0.1%)清洗,然后用2~3倍柱床體積的緩沖液清洗直至pH和電導(dǎo)保持不變。
3.7存儲(chǔ)
保存在4~8℃,20%乙醇溶液中,不可冷凍。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
4.注意事項(xiàng)
(1)使用凝膠過(guò)濾前應(yīng)盡可能將樣品體積濃縮。
(2)樣品必須澄清沒(méi)有顆粒。
(3)為了得到最高的分辨率,上樣體積不能超過(guò)柱床體積的5%。
(4)樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(5)所裝的柱床必須表面平整,無(wú)溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(6)為了保護(hù)蛋白的穩(wěn)定性和活性,需選擇一種緩沖液純化蛋白。
(7)為了避免蛋白和介質(zhì)之間非特異性的離子相互作用,緩沖液中最高可加入0.15mol/L NaCl。
(8)依據(jù)目標(biāo)蛋白的分子量,選擇介質(zhì)分離范圍中值最接近的那種介質(zhì)。
(9)洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
(10)加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
(11)本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Seplife CL-6B | A1002202 | 25ml |
A1002203 | 100ml | |
A1002204 | 500ml | |
A1002205 | 1L | |
A1002206 | 5L | |
A1002207 | 10L |
生產(chǎn)日期:見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
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