Seplife? Oligo dT是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高剛性聚合物親和填料,主要用于捕獲mRNA? Seplife?Oligo dT以聚苯乙烯為基 質(zhì),具有均一的超大孔徑,表面進(jìn)行了特定的長鏈間隔臂修飾并鍵合了自主開發(fā)dT配基,具有較高的載量和特異性結(jié)合力,非特異性吸附 低,可耐受高溫(65t )。
技術(shù)指標(biāo)
產(chǎn)品名稱 | Seplife? Oligo dT |
外觀 | 白色球狀,無臭無味 |
種類 | 親和填料 |
基質(zhì) | 聚苯乙烯 |
配基 | dT20 |
粒徑(u m) | ?50 |
配基密度(umol dT/mL ) | 0.27 |
工作溫度 | 2~65t |
壓縮因子 | 1.06 |
壓力流速(cm/h) | 1000 (0.15MPa條件),根據(jù)實際使用情況調(diào)節(jié)流速,避免超過壓力上限 |
最大耐壓強(qiáng)度(MPa) | 10 |
pH穩(wěn)定性 | 2~13 (長期) |
離子強(qiáng)度 | 0 to 5 M,常用的鹽溶液 |
CIP | 0.1M NaOH |
緩沖體系 | mRNA純化常用的緩沖溶液;0.5 M NaOH, 2 MMgCI2, 20 mM EDTA;避免暴露于以下條件:如強(qiáng)氧化劑 (如次氯酸鹽)、氧化性酸(如硝酸)、強(qiáng)還原劑(如亞硫酸鹽)、丙酮、四氫咲喃或苯甲醇 |
常用溶劑 | 水、0~ 100%乙醇、乙睛、2M乙酸、1 M鹽酸等常用有機(jī)溶劑;避免暴露于以下條件:如強(qiáng)氧化劑(如次氯酸 鹽)、氧化性酸(如硝酸)、強(qiáng)還原劑(如亞硫酸鹽)、丙酮、四氫咲喃或苯甲醇 |
儲存條件 | 20%乙醇溶液,2-813 |
使用方法
3.1 裝柱
根據(jù)填料壓縮因子,勻漿比例50-70%,層析柱內(nèi)徑和實際需求,量取填料,一般填料需要沉降靜置4h讀取體積。用0.1mol/L NaCl或者平衡緩沖液進(jìn)行裝柱。必須保證每種材料都處于工作溫度,所用緩沖液,填料使用前均需要脫氣,填料需要一次倒入裝柱器或者柱管內(nèi),避免多次加料。
Seplife? Oligo dT具有良好的剛性,可以填充在低壓玻璃柱和高壓不銹鋼柱中。填料的壓縮因子范圍建議為1.06-1.5。
對于直徑較小的柱子(≤1cm),我們建議裝柱流速1000 - 2000cm/h;或者使用實際操作系統(tǒng)最大操作流速至少50%的流速裝柱。一般壓柱至少3CV。
層析柱裝填好,用裝填溶液淋洗柱床2-3CV,流速為實際使用流速,以使柱床穩(wěn)定。
為了避免損壞柱床,運(yùn)行時的壓力,不能超過裝柱壓力的80%。
3.2柱效測定
常用測試柱效的方法:
參數(shù) | 條件 |
流速 | 實際操作流速(100-300cm/h) |
流動相 | 0.1M NaCl |
樣品 | 1M NaCl |
上樣量 | 2%柱體積 |
備注:一般上樣前用流動相至少平衡4CV。
3.3平衡
使用3–4 CV平衡緩沖液平衡柱子,常用緩沖液為10 mM Tris-HCl,0.5 M NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4.
3.4 樣品準(zhǔn)備
mRNA樣品用平衡緩沖液混勻,常用緩沖液為10mMTris-HCl, 0.5M NaCl, 1mM EDTA, pH 7.4。
如需變性,可將樣品置于65℃的水浴中加熱10-15min,然后立即將樣品置于冰上。
3.3上樣
以50-150 cm/h的流速上樣。
3.4淋洗
首先,用平衡緩沖液10mMTris-HCl, 0.5M NaCl, 1mM EDTA, pH 7.4淋洗2-3 CV。
然后,用10 mM Tris-HCl,100-300 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4,淋洗3-5 CV,直至電導(dǎo)走平。
3.5洗脫
一般洗脫結(jié)合的mRNA用3-5 CV,10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA, pH 7.4 ;或者使用超純水3-5 CV,進(jìn)行洗脫。
備注:提高溫度至65℃,可以有效提高洗脫速率。
3.6再生
再生緩沖液需要根據(jù)樣品的純度、組成確定。
常用超純水3-5 CV。
對于結(jié)合較強(qiáng)的雜質(zhì)需要使用含0.5M NaOH的20-30%乙醇溶液清洗3-5 CV。
3.7在位清洗
先用3-5CV 0.1M NaOH沖洗,再用平衡緩沖溶液清洗3-5CV,直至電導(dǎo)不變。
3.8存儲
密封保存在2~8℃(保存溶液為20%乙醇)干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過的柱子保存在2~8℃,20%乙醇溶液中。
3.9運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
訂購信息
產(chǎn)品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
Seplife? Oligo dT | PS11225X(50)1-1 | 25ml |
PS11225X(50)1-2 | 100ml | |
PS11225X(50)1-3 | 500ml | |
PS11225X(50)1-4 | 1L | |
PS11225X(50)1-5 | 5L | |
PS11225X(50)1-6 | 10L |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
郵政編碼:710076
聯(lián)系電話:86-29-8110 4050
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注冊人名稱/銷售企業(yè):蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司
注冊人地址/銷售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)
蘇州市工業(yè)園區(qū)裕新路108號
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