Seplife? RP LXMS-10(300)是藍曉科技自主研發(fā)的一款中高壓色譜填料，是以聚苯乙烯/二乙烯基苯為基質(zhì)的多孔高聚物，其具有比表面積大、優(yōu)良的化學(xué)、物理穩(wěn)定性等特點。與傳統(tǒng)反相硅膠填料不耐酸堿，pH操作范圍窄相比，Seplife? RP LXMS-10(300)擁有高流速、高動態(tài)載量的優(yōu)點， 非常適合快速高效層析的應(yīng)用，在提高用戶生產(chǎn)效率的同時，進一步降低了用戶的生產(chǎn)成本。廣泛應(yīng)用于小分子化合物、多肽、低分子量的蛋白和其他生物分子進行反相色譜（reversed phase chromatography RPC）分離。

使用方法

3.1 裝柱

勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果，其濃度為60%-70%。方法如下：

1)色譜柱的柱體積 V，V=Ac×L，Ac=π×r2。

Ac：色譜柱橫截面積；L:色譜柱高度；r：色譜柱半徑。

2) 攪動介質(zhì)形成勻漿液，量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右，防止收縮。

3）用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇，平衡過夜。

4）裝柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%；將勻漿一次性倒入層析柱，沉降平衡后標(biāo)注高度。

5）將分配器裝入，調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10；然后啟動輸液泵，用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。

6）按照 SOP 進行柱效和對稱性的測定，須達到預(yù)定標(biāo)準。 

3.2 柱效評價 

裝好之后，色譜柱用3-5CV超純水清洗。流速控制1-5cm/min平衡并進行柱效測試。

離子交換層析柱的柱效測試方法

樣品：      2 M NaCl 溶液 

上樣量：    1~5 % 柱體積 

洗脫液：    0.5 M NaCl 溶液 

線性流速：  100 cm/h 

檢測：      UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣：電導(dǎo)檢測儀

3.3 清洗 

裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5CV的去離子水清洗。 

3.4平衡

裝柱后先用流動相平衡3-4CV，流速控制1-5cm/min，直到流穿的電導(dǎo)和pH保持不變方可進行上樣。

3.5上樣 

固體樣品可用平衡液溶解配制；低濃度樣品溶液盡量提前濃縮；高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時為了避免堵塞層析柱，樣品需要（離心或膜過濾）澄清處理。上樣量根據(jù)介質(zhì)的載量和樣品中目標(biāo)蛋白的濃度估算，上樣前請確保目標(biāo)物緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。首次試驗可減小上樣量，之后可根據(jù)目標(biāo)物保留時間和峰型增加上樣量。

3.6 洗脫 

采用2-10CV的甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等的（含水）溶液溶出，用酸、堿、緩沖液等調(diào)節(jié)PH值或兩者并用使有效成分洗脫。

3.7再生清洗（CIP） 

先使用乙醇、丙酮、堿+乙醇等溶劑按操作流速沖洗3-4CV，然后用流動相平衡清洗3-4CV。

4.存儲

暫時不使用的層析介質(zhì)需保存在 4～30 ℃ 的 20-25%乙醇中。 

5.運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。

生產(chǎn)日期：見標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

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