Seplife? LXMS 15Q是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一款離子交換填料，以高交聯(lián)的多孔聚苯乙烯/二乙烯苯（PS/DVB）單分散微球?yàn)榛|(zhì)，在微球表面鍵合了化學(xué)穩(wěn)定性極高的親水層。Seplife? LXMS 15Q具有高流速、高分辨率、高載量、高剛性，良好的生物相容性和物理化學(xué)穩(wěn)定性等特點(diǎn)。與傳統(tǒng)層析填料相比，顯著提高了下游純化工藝的生產(chǎn)效率和樣品回收率，廣泛應(yīng)用于抗體、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物分子的捕獲、中度純化、精細(xì)純化。

＊檢測條件：層析柱16mm×200mm；＊柱床高10cm；溫度25℃；流動相為0.1mol/L NaCl

使用方法

3.1 裝柱

勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果，其濃度為60%-70%。方法如下：

1)色譜柱的柱體積 V，V=Ac×L，Ac=π×r2。

Ac：色譜柱橫截面積；L:色譜柱高度；r：色譜柱半徑。

2) 攪動介質(zhì)形成勻漿液，量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右，防止收縮。

3）用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇，平衡過夜。

4）裝柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%；將勻漿一次性倒入層析柱，沉降平衡后標(biāo)注高度。

5）將分配器裝入，調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10；然后啟動輸液泵，用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。

6）按照 SOP 進(jìn)行柱效和對稱性的測定，須達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。 

3.2 柱效評價 

裝好之后，色譜柱用3-5體積超純水清洗。100cm/h流速平衡并進(jìn)行柱效測試。

離子交換層析柱的柱效測試方法

樣品：      2 M NaCl 溶液 

上樣量：    1~5 % 柱體積 

洗脫液：    0.5 M NaCl 溶液 

線性流速：  100 cm/h 

檢測：      UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣：電導(dǎo)檢測儀

3.3 清洗 

裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5BV的去離子水清洗。 

3.4平衡

裝柱后先用流動相平衡，5-10個柱體積，流速控制2-5cm/min，直到流穿的電導(dǎo)和pH保持不變方可進(jìn)行上樣。

3.5上樣 

固體樣品可用平衡液溶解配制；低濃度樣品溶液盡量提前濃縮；高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時為了避免堵塞層析柱，樣品需要（離心或膜過濾）澄清處理。上樣量根據(jù)介質(zhì)的載量和樣品中目標(biāo)蛋白的濃度估算，上樣前請確保目標(biāo)物緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。

3.6 洗脫 

上樣完畢后繼續(xù)用平衡緩沖液淋洗至基線穩(wěn)定， 可以根據(jù)實(shí)際情況采取改變鹽濃度或流動相 pH 的方法依次洗脫吸附于層析介質(zhì)上的樣品。

3.7再生清洗（CIP） 

定期 CIP 清洗，可以防止柱床中蛋白質(zhì)沉淀污染物的富集，有助于保持層析介質(zhì)的載量、分離效果。一般來說需要根據(jù)污染物類型為每個工藝設(shè)計(jì)特定的CIP 清洗方法和CIP 清洗的頻率。推薦 CIP 清洗方法如下：先用 5 BV 1-2 M 的 NaCl 淋洗，然后用5 BV 0.5-1 M 的 NaOH 清洗。

4.存儲

暫時不使用的層析介質(zhì)需保存在 4～30 ℃ 的 20%乙醇或者10mM NaOH溶液中，已經(jīng)裝好的層析柱應(yīng)保存在含 20%乙醇的緩沖液(pH 7.0)；使用前請裝柱后將乙醇清洗干凈。

5.運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

生產(chǎn)日期：見標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

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