Seplife? LXPM SP 5504S層析介質是以聚丙烯酸酯為基質，在表面進行了親水性改性再鍵合了強酸性離子交換基團，具有分辨率高、載量高、化學穩定性好、機械強度大、非特異性吸附小等特點，具有卓越的生物相容性和柱床穩定性，特別適合大規模制備的應用，顯著提高了下游純化工藝的生產效率，可以降低成本，創造出較好的經濟效益，廣泛應用于抗體、蛋白質、多肽、核酸（寡核苷酸）、病毒，胰島素等生物分子的捕獲、中度純化、精細純化。
骨架 | 聚甲基丙烯酸甲酯 |
外觀 | 白色不透明球狀顆粒 |
功能基團 | -O-R-O-(CH2)3-SO3- |
交換容量（mmol/mL） | 0.09-0.13 |
D50v粒度（μm） | 50 |
孔徑（?） | 1000 |
動態載量（mg/ml,Lysozyme） | ≧115 |
pH范圍 | 2-13 |
最大耐壓（MPa） | 0.8 |
| 工作溫度（℃） | 4-30 |
存儲 防腐劑 | 20%乙醇溶液，150mol/l NaCl |
再生 | 0.5-2M NaCl溶液 |
清洗 | 0.1-0.5M NaOH溶液（或者50%乙醇） |
| 穩定性 | 所有常用緩沖液，1M醋酸，1M NaOH，1M鹽酸，100%乙醇、IPA等常用有機溶劑；避免接觸強氧化劑 |
使用方法
3.1 裝柱
勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果，其濃度為60%-70%。方法如下：
1)色譜柱的柱體積 V，V=Ac×L，Ac=π×r2。
Ac：色譜柱橫截面積；L:色譜柱高度；r：色譜柱半徑。
2) 攪動介質形成勻漿液，量取所需質量或體積。其為柱體積的1.2倍左右，防止收縮。
3）用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇，平衡過夜。
4）裝柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液調整勻漿濃度為 65 ~ 70%；將勻漿一次性倒入層析柱，沉降平衡后標注高度。
5）將分配器裝入，調節高度使得壓縮系數為 1.05 ~ 1.10；然后啟動輸液泵，用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩定。
6）按照 SOP 進行柱效和對稱性的測定，須達到預定標準。
3.2 柱效評價
裝好之后，色譜柱用3-5體積超純水清洗。100cm/h流速平衡并進行柱效測試。
離子交換層析柱的柱效測試方法
樣品： 2 M NaCl 溶液
上樣量： 1~5 % 柱體積
洗脫液： 0.5 M NaCl 溶液
線性流速： 100 cm/h
檢測： UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣：電導檢測儀
3.3 清洗
裝好的色譜柱應使用至少使用5BV的去離子水清洗。
3.4 平衡
使用適當的5-10倍柱體積緩沖液進行柱子的平衡，至流出液電導和pH不變（與平衡液一致），緩沖液 如 Buffer A，如 20 mM PBS, pH7.0，具體的緩沖體系應根據目標蛋白的穩定性和等電點、離子交換介質的種類進行篩選和優化。
3.5上樣
固體樣品可用平衡液溶解配制；低濃度樣品溶液可用平衡液透析；高濃度樣品溶液可用 平衡液稀釋。為了避免堵塞層析柱，樣品應經離心或膜過濾處理。進料量根據介質的載量和料液中目標蛋白的含量計算，上樣前確保樣品緩沖液應盡可能與平衡液一致。
3.6洗脫
上樣完畢后繼續用平衡緩沖液淋洗至基線穩定，可以根據實際情況采取提高鹽濃度或改變流動相 pH 的方法依次洗脫吸附于層析介質上的樣品。
3.7再生
每次層析之后可用0.5-2 M NaCl 清洗層析柱，除去強結合于層析介質上的蛋白。
3.8 在位清洗
為了保持層析柱的性能，若有蛋白質或其他雜質在再生過程中未能有效去除，可執行在 位清洗步驟，在位清洗時，也可采用反向沖洗的方法，具體操作步驟如下：
（1）對于通過離子鍵結合過強的蛋白，可用3BV以上的2M NaCl 清洗，并用3BV以上的去離子水清洗；
（2）對沉淀蛋白、以疏水性結合的蛋白或脂蛋白，可用0.2~0.5 M NaOH 清洗（與層析介質接觸時間 1~2 h），并用5BV以上平衡液和3BV以上的去離子水清洗；
（3）對強疏水性結合的蛋白、脂蛋白和脂類物質，可用5BV以上的50%乙醇或 30%異丙醇 清洗（與層析介質接觸時間0.5-1 h），并用 5 BV 以上的去離子水清洗。也可用含非離子表面活性劑的堿性或酸性溶液清洗，如0.1~0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M乙酸清洗 1-2 h，并用5BV以上的50%乙醇沖洗去除去污劑，然后用5BV以上的純水沖洗（使用高濃度的有機溶劑時，為了避免產生氣泡，應采用逐步增加有機溶劑濃度的方法）。
3.9 應用案例
（1）填料：5ml預裝柱，Seplife? LXPM SP5504S
（2）樣品：某豬圓環發酵液，上樣量：5ml
（3）平衡緩沖液A：20mmol/L PB，PH7.0
（4）洗脫緩沖液：20mmol/L PB+1mol/L Nacl，PH7.0
（5）洗柱溶液：0.5M NaOH
圖1.Seplife? LXPM SP5504S純化蛋白色譜圖
備注：藍色曲線：Seplife? LXPM SP5504S
紫色曲線：某外樣
4.存儲
暫時不使用的層析介質需保存在 4～30℃ 的 20%乙醇中，已經裝好的層析柱應保存在含 20%乙醇的緩沖液(pH 7.0)；使用前請裝柱后將乙醇清洗干凈。
5.運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規格 |
Seplife? LXPM SP5504S | PM50124S1-1 | 25ml |
PM50124S1-2 | 100ml | |
PM50124S1-3 | 500ml | |
PM50124S1-4 | 1L | |
PM50124S1-5 | 5L | |
PM50124S1-6 | 10L |
生產日期：見標簽
使用期限：在適當的貯藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產企業：西安藍曉科技新材料股份有限公司
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售后服務單位：西安藍曉科技新材料股份有限公司
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