陜西蛋白純化批發(fā)價(jià)格
發(fā)布時(shí)間：2022-10-10 01:58:05
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CHO細(xì)胞培養(yǎng)后先經(jīng)過(guò)離心的方式去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片，也可用微濾或者深層過(guò)濾的方式去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片。去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片后用rProtein A親和層析介質(zhì)經(jīng)親和層析捕獲，把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來(lái)，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質(zhì)。
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GST標(biāo)簽蛋白純化親和層析介質(zhì)：谷胱甘肽配基是通過(guò)12個(gè)原子連接臂偶聯(lián)到4%的高流速瓊脂糖層析介質(zhì)上，這種偶聯(lián)使得介質(zhì)對(duì)GST-tag融合蛋白和其他谷胱甘肽結(jié)合蛋白有更強(qiáng)的結(jié)合能力，介質(zhì)的高蛋白載量和良好的流速性能使大規(guī)模生產(chǎn)簡(jiǎn)單直接。
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親和層析介質(zhì)的特點(diǎn)：1、基于配體和分離物間的特異性親和作用，分離選擇性強(qiáng)，效果好，純化倍數(shù)高。2、能完成一步方法很難完成的分離，如變性和非變性的，功能不同的蛋白。3、通常一步純化就可達(dá)到>90%的純度。4、速度快，操作簡(jiǎn)單。
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DEAE-52和DEAE-FF有什么區(qū)別：兩者都是弱陰離子填料。DEAE-52是纖維素基質(zhì)，平均粒徑50um，DEAE-FF是瓊脂糖基質(zhì)，中心粒徑90um。同樣的上樣流速前者反壓明顯大于后者，無(wú)法滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求，現(xiàn)在市面上很少有提供DEAE-52的，工業(yè)化生產(chǎn)都在用DEAE-FF或者更高剛性的，兩者選擇的話，強(qiáng)烈推薦使用DEAE-FF。
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藍(lán)色染料親和層析介質(zhì)：藍(lán)色染料親和介質(zhì)是將藍(lán)色染料汽巴蘭偶聯(lián)到高流速瓊脂糖微球上的一種親和層析介質(zhì)，該產(chǎn)品有很高的化學(xué)穩(wěn)定性。其與目標(biāo)蛋白的結(jié)合主要是配基提供的電子對(duì)與疏水作用的綜合結(jié)果，可適用于白蛋白，干擾素，凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+的酶的分離純化。
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His-Tag融合蛋白純化常見(jiàn)問(wèn)題：1.His標(biāo)簽蛋白不和介質(zhì)結(jié)合。a可能原因：超聲功率不合適（太大，蛋白碳化，太小，蛋白沒(méi)完全釋放)。解決方法：改變超聲功率或者其它方法破碎細(xì)胞。b.樣品或緩沖液不合適。解決方法：確保緩沖液中螯合劑，還原劑，咪唑濃度不是很高。c.His標(biāo)簽暴露不完全。解決方法：在緩沖液中加變性劑（4-8M尿素，4-6M鹽酸胍），然后用IMAC介質(zhì)純化。d.His標(biāo)簽丟失。