山東蛋白純化廠家供應
發布時間：2022-06-18 01:58:27
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高流速瓊脂糖疏水層析介質是將不同性質的疏水基團偶聯到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質上形成的疏水性層析分離介質，利用生物分子表面的疏水基團與層析介質上的疏水基團相互作用強弱不同進行分離。一般而言，離子強度（鹽濃度）越高，物質所形成的疏水鍵越強。影響疏水作用的因素包括：鹽濃度，溫度，pH，表面活化劑和有機溶劑。高流速瓊脂糖疏水層析介質廣泛應用于生物大分子的純化分離。
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洗脫峰雜質多，可能原因：非特異性結合，清洗不徹底，降解等。解決方法：蛋白純化過程加蛋白抑制劑防止降解，上樣完后要徹底清洗，加一定的NaCl和咪唑減少非特異性結合。使用幾次后，介質結合效率降低，柱效降低?？赡茉颍航橘|上沉積大量雜質等。解決方法：徹底清洗，IDA/IMAC脫鎳再生處理。
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GST標簽蛋白純化親和層析介質：谷胱甘肽配基是通過12個原子連接臂偶聯到4%的高流速瓊脂糖層析介質上，這種偶聯使得介質對GST-tag融合蛋白和其他谷胱甘肽結合蛋白有更強的結合能力，介質的高蛋白載量和良好的流速性能使大規模生產簡單直接。
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硼酸親和層析介質：硼酸能和1，2順式二醇結合，所以硼酸瓊脂糖介質可以用于糖類，核苷，核酸，肽及酶類的分離純化，特別適合糖蛋白的分離純化。本產品將硼酸類化合物偶聯到活化的瓊脂糖凝膠4FF上，用于上述物質的分離純化。
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層析填料被污染或老化：隨著填料的使用，一些雜質的積累會使層析填料的孔徑發生變化（如堵塞，非特異性吸附積累，微生物污染，破碎等），導致其排阻能力發生偏差而影響分離度。此時可對填料進行CIP清洗，若清洗后還不能達到分離要求，就要更換新的填料。
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His-Tag融合蛋白純化常見問題：1.His標簽蛋白不和介質結合。a可能原因：超聲功率不合適（太大，蛋白碳化，太小，蛋白沒完全釋放)。解決方法：改變超聲功率或者其它方法破碎細胞。b.樣品或緩沖液不合適。解決方法：確保緩沖液中螯合劑，還原劑，咪唑濃度不是很高。c.His標簽暴露不完全。解決方法：在緩沖液中加變性劑（4-8M尿素，4-6M鹽酸胍），然后用IMAC介質純化。d.His標簽丟失。