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發布時間：2023-04-23 01:50:01
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DEAE-52和DEAE-FF有什么區別：兩者都是弱陰離子填料。DEAE-52是纖維素基質，平均粒徑50um，DEAE-FF是瓊脂糖基質，中心粒徑90um。同樣的上樣流速前者反壓明顯大于后者，無法滿足工業化生產需求，現在市面上很少有提供DEAE-52的，工業化生產都在用DEAE-FF或者更高剛性的，兩者選擇的話，強烈推薦使用DEAE-FF。
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由細胞的貼壁、生長狀態、細胞密度及消化后重新貼壁情況觀察可以得出，Vero細胞在藍曉科技微載體Seplife LX-MC-Dex1上能夠生長，胰酶消化后細胞分散情況符合標準，是病毒類生物制品制備之利器。層析介質國產化替代，藍曉科技有多糖微球介質，大孔聚合物微球介質，多模式介質等，全力助力生物制品下游工藝過程中層析介質的國產化替代。
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建立蛋白質純化工藝時，最重要的是需要考慮純化得到的蛋白質應能滿足其后續應用要求。蛋白質的含量及純度都必須滿足應用要求。而且，因為后續應用需要的是保持良好折疊結構的活性蛋白質，因此蛋白質活性的相關信息也需要考慮。在純化及后續的保存過程中，很多處理方法都會對蛋白質的性質產生影響，如蛋白質的去折疊、聚集、降解和失活等。制定詳細計劃，在最短時間內完成蛋白質純化，并在最穩定的條件下進行保存才算是成功地完成了其整個純化過程。
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CHO細胞培養后先經過離心的方式去除細胞及細胞碎片，也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質經親和層析捕獲，把單抗從培養液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養基組份物質。
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親和層析捕獲后，進一步用強陽離子交換層析SP Seplife Large Scale層析介質繼續純化捕獲的單抗，進一步去除少量的HCP,HCD及第1步親和層析捕獲時rProtein A親和介質脫離的親和配基rProtein A。強陽離子交換層析后，通過調pH的方式用pH3.7-3.8的環境進行病毒滅活。低pH病毒滅活后，在通過陰離子交換層析Q Seplife Large Scale流穿模式，讓單抗流穿，層析介質吸附痕量的雜質進一步純化。
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GST標簽蛋白純化親和層析介質：谷胱甘肽配基是通過12個原子連接臂偶聯到4%的高流速瓊脂糖層析介質上，這種偶聯使得介質對GST-tag融合蛋白和其他谷胱甘肽結合蛋白有更強的結合能力，介質的高蛋白載量和良好的流速性能使大規模生產簡單直接。