陜西層析填料批發價格
發布時間：2022-12-12 01:57:07
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Seplife? Plasmid LX層析介質是藍曉科技自主研發的一種新型高度交聯的親硫芳香族瓊脂糖層析介質，用于純化超螺旋DNA，廣泛應用于基因治療和DNA疫苗的開發應用。該層析介質具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學穩定性和機械性特點，方便進行規模放大，可縮短生產時間，提高生產效率。
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建立蛋白質純化工藝時，最重要的是需要考慮純化得到的蛋白質應能滿足其后續應用要求。蛋白質的含量及純度都必須滿足應用要求。而且，因為后續應用需要的是保持良好折疊結構的活性蛋白質，因此蛋白質活性的相關信息也需要考慮。在純化及后續的保存過程中，很多處理方法都會對蛋白質的性質產生影響，如蛋白質的去折疊、聚集、降解和失活等。制定詳細計劃，在最短時間內完成蛋白質純化，并在最穩定的條件下進行保存才算是成功地完成了其整個純化過程。
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洗脫峰雜質多，可能原因：非特異性結合，清洗不徹底，降解等。解決方法：蛋白純化過程加蛋白抑制劑防止降解，上樣完后要徹底清洗，加一定的NaCl和咪唑減少非特異性結合。使用幾次后，介質結合效率降低，柱效降低。可能原因：介質上沉積大量雜質等。解決方法：徹底清洗，IDA/IMAC脫鎳再生處理。
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層析體系需要優化，緩沖體系的pH要在7.5-8.3之間，添加200-500mM氯化鈉減少非特異性吸附，上樣完后要徹底清洗，保證層析填料孔內，顆粒間未結合的蛋白全部洗出后，在開始洗脫，保證上完樣后，清洗在10CV以上。洗脫過程需要摸索咪唑的強度梯度，用連續咪唑梯度來摸索洗脫濃度。
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